家畜布氏桿菌病的檢疫方法

    布氏桿菌病是由布氏桿菌引起的人畜共患傳染病。該病在家畜中以羊、牛、豬最易感，造成患病家畜生殖器官和胎膜發(fā)炎，引起流產(chǎn)、不育和各種組織病變，患病公畜則表現(xiàn)為關(guān)節(jié)炎和睪丸炎。人感染后的表現(xiàn)較為復(fù)雜，大多出現(xiàn)波浪熱、關(guān)節(jié)疼痛、睪丸炎及子宮內(nèi)膜炎等癥狀。

    1  流行病學(xué)

    該病的傳染性極強(qiáng)，易感動(dòng)物范圍很廣，羊、牛、豬、牦牛、鹿、駱駝、野豬、馬、狗、狐、狼、野牛、野兔、猴、羚羊、雞、鴨及一些嚙齒動(dòng)物均能感染，而羊、牛、豬最易感。傳染源是病畜及帶菌動(dòng)物，主要感染途徑是消化道，即通過污染的飼料與飲水而感染，也能通過皮膚、結(jié)膜和交配等感染。人接觸病畜及其產(chǎn)品，如接產(chǎn)、飲用病畜生乳或制品、食用未經(jīng)煮透的病畜肉等都能感染。

    2  活體檢疫

    母畜最顯著的癥狀是流產(chǎn)，可發(fā)生于妊娠期任何階段，但牛常發(fā)生于懷孕后的6~8個(gè)月、羊3~4個(gè)月、豬1~3個(gè)月。流產(chǎn)前精神和食欲不振，陰唇和乳房腫脹，陰道黏膜紅腫，流出不潔的分泌物。流產(chǎn)后胎衣往往停滯，胎兒死亡，常發(fā)生子宮炎，長期不愈，屢配不孕，失去生育能力。公畜發(fā)病的癥狀是睪丸炎和副睪炎。

    3  肉尸檢疫

    該病的明顯病變在子宮、胎兒及胎衣。胎衣呈黃色膠凍樣浸潤，有的部位覆有纖維素片和膿液，有的增厚并有出血斑點(diǎn)。胎兒呈現(xiàn)敗血癥變化。胃特別是第四胃有淡黃色或白色黏液絮狀物。淋巴結(jié)、脾臟和肝臟呈現(xiàn)不同的腫脹，出現(xiàn)散在壞死灶。公畜睪丸和副睪有炎性壞死灶和化膿灶。該病的明顯癥狀是流產(chǎn)，但是彎桿菌病、胎兒滴蟲病、鉤端螺旋體病、乙型腦炎、衣原體病、豬細(xì)小病毒病和藍(lán)耳病都能發(fā)生流產(chǎn)，因此必須通過實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)與之鑒別。

    4  實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

    布氏桿菌病檢疫的檢驗(yàn)方法有病原學(xué)檢查和血清學(xué)檢查兩種。動(dòng)物檢疫常采用的血清學(xué)方法有虎紅平板凝集試驗(yàn)、乳牛布氏桿菌病全乳環(huán)狀試驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)和補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)等。前兩者主要用于動(dòng)物檢疫的篩選，后兩者主要用于布氏桿菌病的定性。
    
   （1）虎紅平板凝集試驗(yàn)。適用于各種家畜布氏桿菌病篩選試驗(yàn)。出現(xiàn)陽性反應(yīng)的血清樣品，應(yīng)根據(jù)情況進(jìn)行試管凝集試驗(yàn)或補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)，或布氏桿菌病其他診斷試驗(yàn)確定。

    材料準(zhǔn)備。準(zhǔn)備好虎紅抗原（由獸醫(yī)生物藥品廠供應(yīng)），按說明書使用。抗原宜在4~15℃冰箱保存，不能凍結(jié)。其外觀應(yīng)呈玫瑰紅色的懸浮液，有凝集者棄之。使用前充分搖勻，置室溫中30~60分鐘。標(biāo)準(zhǔn)陰、陽性血清由獸醫(yī)生物藥品廠供應(yīng)。被檢血清須新鮮、無溶血、無腐敗現(xiàn)象，保存期不超過15日。

    實(shí)驗(yàn)方法。取一潔凈的玻璃板，畫成20mm×20mm的方格。每一格分別滴入被檢血清約0.03mL，然后在被檢血清旁滴加虎紅抗原0.0mL（使用時(shí)先將抗原瓶搖動(dòng)，使之均勻懸浮），用牙簽或小棒攪動(dòng)血清和抗原，使抗原液混合。于4分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。結(jié)果判定。如果在4分鐘內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象者判為陽性，否則判為陰性。

   （2）乳牛布氏桿菌病全乳環(huán)狀試驗(yàn)（MRT）。該方法適用于乳牛場泌乳母牛布魯氏菌病的監(jiān)測和篩選試驗(yàn)。受檢乳必須為新鮮的全脂乳。對患有乳房疾病的乳汁、加工處理后的牛乳、腐敗變質(zhì)和凍結(jié)過的乳不能使用。采集乳樣時(shí)應(yīng)將母畜的乳房用溫水洗凈，再用紗布擦干，然后擠于潔凈的器皿中。夏季應(yīng)于當(dāng)天檢查，若保存于2℃，7天內(nèi)仍可使用。

    材料準(zhǔn)備。事先準(zhǔn)備好布氏桿菌病全乳環(huán)狀抗原（由獸醫(yī)生物藥品廠供應(yīng)）。目前我國生產(chǎn)的全乳環(huán)狀反應(yīng)抗原有兩種，一種是蘇木素染色抗原，呈藍(lán)色；另一種是四氮唑染色抗原，呈紅色。試驗(yàn)結(jié)果均按乳脂和乳柱的顏色判定。其他器材包括凝集試驗(yàn)管、試管架、吸管、微量加樣器和水浴箱等。

    實(shí)驗(yàn)方法。取乳樣1mL加入滅菌凝集試驗(yàn)管。將全乳環(huán)狀抗原充分搖蕩均勻后取1滴（約50uL）加入乳樣中充分混勻，置37~38℃水浴中60分鐘。取出后勿振蕩，立即按乳脂和乳柱的顏色進(jìn)行判定。

    結(jié)果判定。乳柱上層乳脂形成紅色或藍(lán)色環(huán)帶、乳柱白色、分界分明的為強(qiáng)陽性反應(yīng)。乳脂層的環(huán)帶雖呈紅色或藍(lán)色，但不顯著，乳柱略帶顏色為陽性反應(yīng)。乳脂層的環(huán)帶顏色較淺，但比乳柱顏色略深為弱陽性反應(yīng)。乳始層環(huán)帶不明顯，與乳柱分界不清，乳柱不褪色為疑似反應(yīng)。 乳柱上層無變化，乳柱顏色均勻?yàn)殛幮苑磻?yīng)。脂肪較少或無脂肪的乳樣呈陽性反應(yīng)時(shí)，菌體呈凝集現(xiàn)象下沉管底，判定時(shí)以乳柱的反應(yīng)為準(zhǔn)。

    由于布氏桿菌病是人畜共患病，是威脅畜牧或獸醫(yī)從業(yè)者的一種嚴(yán)重的職業(yè)病，必須引起重視，在生產(chǎn)中要做好該病的檢疫工作，及時(shí)淘汰感染和發(fā)病動(dòng)物，并注意做好自身的防護(hù)工作。

   （孟慶彤、王美玲  遼寧省彰武縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心）