對種公豬采精后,精液的品質檢查和稀釋、分裝、儲存、運輸便成為重要環節。
1 精液品質檢查
(1)采精量。采集精液后稱重,按每克1mL計,避免以量筒等測量精液的體積。
(2)顏色。正常的精液是乳白色或淺灰色,精子密度越高,色澤愈濃,透明度愈低。帶有綠色、黃色、淺紅色、紅褐色等異常顏色的精液應廢棄。
(3)氣味。豬精液略帶腥味,如有異常氣味,應廢棄。
(4)pH值(酸堿度)。以pH計或pH試紙測試,正常范圍為7.0~7.8。
(5)精子活力檢查。精子活力是指呈直線運動的精子所占百分率。在顯微鏡下觀察,一般按0.1~1.0區間的10級評分法估計,鮮精活力要求不低于0.7。檢查活力時要求載玻片和蓋玻片都應在 37℃下預熱。
(6)精子密度。指每毫升精液中所含的精子數,是確定稀釋倍數的重要標準。要求用血細胞計數板計數或精液密度儀測定。血細胞計數方法:以微量加樣器取具有代表性原精液200uL,用3%NaCl稀釋10倍;在血細胞計數板上放一蓋玻片,取1滴稀釋液后精液置于計數板的槽中,靠虹吸將精液吸入計數室內;在高倍鏡下計數5個中方格內的精子總數,將該數乘以50萬,即得到原精液每毫升所含的精子數(即精液密度)。
(7)精子畸形率。畸形率是指異常精子的百分率。一般要求畸形率不超過18%。其測定可用普通顯微鏡,但需伊紅或姬姆薩染色,利用相差顯微鏡可直接觀察活精子的畸形率。公豬使用過頻或在高溫環境下會出現精子尾部帶有原生質滴的畸形精子。畸形精子種類很多,如巨型精子、短小精子、雙頭或雙尾精子、頂體膨脹或脫落、精子頭部殘缺或尾部分離、尾部變曲的精子等。要求對每頭公豬每2周檢查一次精子畸形率。
2 精液稀釋、分裝、儲存和運輸
(1)稀釋液。稀釋液按稀釋液配方配制,配好應及時貼上標簽、標明品名、配制日期、時間及經手人等。在冰箱內4℃條件下保存,不超過24小時。
(2)原精液稀釋后體積計算。原精液總有效精子數=原精液體積(或重量g)×精子密度(單位:個/mL)×活率。
原精液稀釋后的體積(或重量)=原精液稀釋后可分裝的份數(取整數)×每份精液的體積(或重量)。每份精液中有效精子數推薦值為30億,每份精液的體積推薦值為80~100mL。
(3)精液稀釋。精液采集后應盡快稀釋,原精儲存不超過30分鐘。未經品質檢查或檢查不合格(活力0.7以下)的精液不能稀釋。稀釋液與精液要求等溫稀釋,兩者溫差不超過1℃,即稀釋液應加熱至 33~37℃,以精液溫度為標準,來調節稀釋液的溫度,絕不能反過來操作。稀釋時,將一個塑料杯(1000~1500mL)放在電子秤上,除皮后,將裝精液的采精袋從保溫杯中取出,放入這個大塑料杯中,并將袋口翻在杯外。如果集精容器為一次性紙杯,則需將紙杯中的精液倒入裝入食品袋的塑料杯中并放在電子秤上。也可在此時稱量并記錄精液重量。然后向杯中徐徐加入與精液等溫的稀釋液,直到達到所計算出的最終重量。稀釋倍數的確定。要求每個輸精劑量含有效精子數30億以上。稀釋后要求靜置片刻再作精子活力檢查,如果稀釋前后活力無太大變化,即可進行分裝與保存。如果活力顯著下降,則不要使用。
(4)精液分裝。一次性輸精瓶的分裝。是將塑料杯中稀釋后的精液分別加入不同的輸精瓶中,使精液面達到輸精瓶上相應的刻度處(如100mL),然后擰上輸精瓶蓋。一次性輸精袋分裝。將輸精袋的兩個懸掛孔掛在專門用于分裝精液的支架上,在輸精袋中插上一次性塑料漏斗,放在電子秤上,然后除皮。將塑料杯中稀釋后的精液通過漏斗徐徐加入輸精袋中,直到達到規定的重量(如100g),取下漏斗和輸精袋,掛上一個新的輸精袋,再將漏斗插入,分裝另一袋精液。分裝后的輸精袋用塑料熱封口機封口。在輸精瓶或袋上表明公豬品種、耳號、生產日期、保存有效期、稀釋液名稱和生產單位等。
(5)精液儲存。將分裝后的輸精容器放入泡沫塑料盒中,在室溫下緩慢降溫30分鐘,再將輸精容器放入17℃恒溫箱內的擱架上保存。保存過程中不要頻繁打開冰箱,并且每隔12小時輕輕翻轉一次,防止精子沉淀而引起死亡。短效稀釋液可保存3天,中效稀釋液可保存4~6天,長效稀釋液可保存7~9天,無論何種稀釋液保存精液,都應盡快用完。
(6)精液運輸。由于熱應激或冷應激,以及紫外線的影響,精液品質會發生變化,使精子活力降低。因此,精液運輸應置于保溫較好的裝置內,保持在16~18℃。精液運輸過程中應避免強烈震動。
(呂成繼 黑龍江省林口縣畜牧獸醫局動物疫病預防與控制中心)