一、如何破解？
該場(chǎng)泌乳牛3400余頭，既往近19個(gè)月期間（2019年2月至2020年8月）原奶衛(wèi)生質(zhì)量統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示：月平均臨床乳房炎為1.4%（0.8%-1.9%），體細(xì)胞平均數(shù)為17.2萬（16.1-26.5萬），大罐奶樣微生物平均數(shù)為0.4萬（0.1-0.8萬）；即使在全球同行業(yè)對(duì)擂，業(yè)績(jī)也屬上乘表現(xiàn)。雖然從所發(fā)照片可看出臥床管理仍有需要改善之處，但因長(zhǎng)達(dá)近19個(gè)月期間臨床乳房炎月平均發(fā)病率僅為1.4%（0.8%-1.9%），優(yōu)于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)1.5%，所以病因?qū)W破解突破點(diǎn)并不可完全歸咎于憩息環(huán)境差和臥床管理不到位。該病自7月26日首先發(fā)病10頭，至8月1日迅速在全群蔓延擴(kuò)散，具有鮮明的傳染性極強(qiáng)和極快特征，這自然大大壓縮了大海撈針?biāo)坡煸\斷遐想，而應(yīng)將關(guān)注重點(diǎn)放在：究竟哪些傳染性致病微生物可造成奶牛乳頭及其鄰近乳區(qū)皮膚損傷？
二、哪些傳染性致病微生物可造成乳頭及其鄰近乳區(qū)皮膚損傷？
造成乳頭及其鄰近乳區(qū)皮膚損傷的傳染性致病微生物可細(xì)分為如下九類：
1、牛乳頭瘤病毒。
2、牛皰疹病毒2型/4型（Bovine Herpes Virus 2: BHV-2; Bovine Herpes Virus 4: BHV-4）。
3、牛痘病毒。
4、偽牛痘病毒。
5、口蹄疫病毒。
6、牛毛癬菌。
7、金黃色葡萄球菌。
8、前庭口炎病毒。
9、厭氧壞死梭形菌。
對(duì)照以上9類不同傳染性致病微生物造成乳頭及其鄰近乳區(qū)皮膚損傷特征，以及感染至發(fā)病潛伏期長(zhǎng)短，可基本鎖定屬牛皰疹病毒2型/4型感染損傷（潛伏期4-10日）。又由于牛皰疹病毒4型屬γ皰疹病毒亞科新成員，對(duì)牛類動(dòng)物血管內(nèi)皮細(xì)胞、乳腺組織、子宮內(nèi)膜、胎兒組織均有很強(qiáng)親和力，并造成相應(yīng)嚴(yán)重?fù)p傷，而該場(chǎng)罹病牛并不伴發(fā)這些關(guān)聯(lián)臨床癥狀，故可暫時(shí)排除牛皰疹病毒4型感染假設(shè)。不過，牛皰疹病毒2型感染損傷常致乳頭及其臨近乳區(qū)皮膚表層潰瘍，臨床特征與病程長(zhǎng)短與該場(chǎng)罹病牛所見吻合。1957年在非洲首次發(fā)見牛皰疹病毒2型感染乳頭及其臨近乳區(qū)臨床病例，稱為牛皰疹病毒2型乳頭炎（Bovine Herpes Mammillitis: BHM）；繼后不少國(guó)家相繼有此病報(bào)道，我國(guó)于2000年9月初次確診本病，隨后各地陸續(xù)零星發(fā)生。基此，初步診斷為牛皰疹病毒2型乳頭炎。為進(jìn)一步確證初步診斷，現(xiàn)場(chǎng)采集10頭痊愈牛病變部位結(jié)痂樣品送四川農(nóng)業(yè)大學(xué)曹隨忠校長(zhǎng)團(tuán)隊(duì)（反芻動(dòng)物疾病研究中心）應(yīng)用PCR技術(shù)檢測(cè)牛皰疹病毒2型。
三、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)檢測(cè)結(jié)果如何？
檢測(cè)報(bào)告
1、樣品信息
（1）收樣日期：2020年8月20日。
（2）樣品種類：10份痂皮，參見圖2。
2、檢測(cè)要求
檢測(cè)牛皰疹病毒2型。
對(duì)10份液體樣品提取DNA，同時(shí)將樣品中的痂皮混合成兩個(gè)樣品研磨后提取DNA。進(jìn)行牛皰疹病毒2型特異性PCR驗(yàn)證。
（1）檢測(cè)用品信息，參見表1。
（2）檢測(cè)引物信息，參見表2（牛皰疹病毒2型參考序列號(hào)為M21628）。
4、PCR檢測(cè)結(jié)果
參見圖3.
5、初步診斷結(jié)論
PCR結(jié)果顯示5號(hào)和6號(hào)樣品出現(xiàn)目的條帶，約為500bp，與目的條帶大小一致，說明樣品中存在牛皰疹病毒2型；但條帶暗淡且模糊，可能緣于樣品病毒載毒量較小或采樣時(shí)間不恰當(dāng)?shù)仍蛟斐蒁NA模板質(zhì)量不高，影響PCR過程。牛皰疹病毒2型在皰疹液內(nèi)含量很高，在發(fā)病初始階段采取皰疹液樣品容易分離和鑒定病毒，但供檢測(cè)的10個(gè)樣品均采自罹病牛損傷乳頭及其鄰近乳區(qū)業(yè)已痊愈的皮膚痂。
四、中美兩國(guó)診斷本病效率如何？
我曾在美國(guó)明尼蘇達(dá)州政府獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室（全美每個(gè)州均設(shè)置本州獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室）工作多年，本病從2020年8月11日?qǐng)?bào)告，至8月26日初步破解，歷時(shí)15日，而我們美國(guó)同行大約只需不足4日即可破解，現(xiàn)將兩國(guó)破解流程中各環(huán)節(jié)時(shí)長(zhǎng)差異藉表3簡(jiǎn)潔說明。
五、如何正確治療牛皰疹病毒2型乳頭炎？
因?qū)俨《靖腥局虏。时静簾o特效療法，只能對(duì)癥治療和采取支持療法。對(duì)業(yè)已發(fā)病牛，可選下列任何一種溶液涂敷患部：10%甘油聚維酮碘、碘甘油，或10%甘油去腐生肌散；如欲防止夏季蚊蠅騷擾，可涂敷萬金油或薄荷油；早期發(fā)病痛感強(qiáng)烈患牛可給予非固醇類抗炎藥物緩解；這些處理均可加快愈合過程；一般輕癥病例5-7日即可痊愈，嚴(yán)重病例則需要2-3周左右時(shí)間恢復(fù)；應(yīng)始終警惕繼發(fā)臨床乳房炎風(fēng)險(xiǎn)。
六、如何正確預(yù)防牛皰疹病毒2型乳頭炎？
牛皰疹病毒2型乳頭炎目前尚無市售特異疫苗可用。比較可行的現(xiàn)場(chǎng)有效預(yù)防措施如下：
1、設(shè)立隔離圈留置罹病牛并最后擠奶。
2、注意擠前用含游離碘5000PPM藥浴液充分浸泡乳頭到位并滯留逾30秒。
3、用含70%酒精濕紙巾擦干凈乳頭后再套杯。
4、夏季應(yīng)用10%甘油含游離碘10000PPM后藥浴；冬季可使用高含量脂肪酸乳頭防凍液。
5、加強(qiáng)夏季消滅蚊蠅工作。
6、一旦牛群感染本病，即非常難以徹底凈化。因本病常由頭胎牛始發(fā)，所以需要特別加強(qiáng)關(guān)注頭胎新產(chǎn)牛，一旦發(fā)現(xiàn)癥狀即刻隔離和治療，避免進(jìn)一步在全群擴(kuò)散。
七、還需要知道牛皰疹病毒2型乳頭炎哪些信息？
1、皰疹病毒傳染病是如何被人類逐漸認(rèn)識(shí)與理解的？
皰疹病毒感染疾病早在古希臘時(shí)期就已流行，系已知最古老的性傳播感染疾病之一，西歐各國(guó)史書曾記錄了本病的基本癥狀和諸多治療措施，但當(dāng)時(shí)治愈率并不高；皰疹病毒傳染病僅只是在近數(shù)百年方被人類逐漸認(rèn)識(shí)和透徹理解。眾所周知，希波克拉底（公元前460-370）曾描述了皰疹單純病變的皮膚傳染病，皰疹這個(gè)詞取自希臘文“皰疹(Herpes)”，意思“蠕變或爬行”，形象地描述了皰疹皮膚病變的傳播方式和性質(zhì)。甚至莎士比亞也熟悉復(fù)發(fā)性皰疹單純病變及其傳播特點(diǎn)。在《羅密歐與朱麗葉》中，莎士比亞如此描寫瑪布王后：“歐爾女士們的香唇直接交互親吻如醉如癡，其中憤怒的瑪布王后罹患水泡瘟疫，因?yàn)榫奂叩暮粑驼写枪晃廴尽！?然而，直到1893年，法國(guó)科學(xué)家埃米爾·維達(dá)爾才通過實(shí)驗(yàn)證明皰疹可從一個(gè)人傳染給另一個(gè)人。
2、牛皰疹病毒能造成牛類動(dòng)物哪些疾病？
幾類皰疹病毒科亞科病毒如α皰疹病毒和γ皰疹病毒常感染牛致嚴(yán)重疾病，如大家熟悉的牛皰疹病毒1型（BHV-1）常致牛傳染性鼻氣管炎、傳染性膿皰性外陰陰道炎和傳染性龜頭炎。而牛α皰疹病毒2型（即牛皰疹病毒2型）與人類皰疹病毒1型抗原性相關(guān)，常致感染牛發(fā)生兩種明顯獨(dú)特截然不同疾病：
（1）類似于牛傳染性皮膚結(jié)節(jié)病（由痘病毒引起）的偽牛皮膚結(jié)節(jié)病，這兩種牛皮膚結(jié)節(jié)病臨床難以鑒別診斷。
（2）牛潰瘍性乳頭炎，也稱牛皰疹乳頭炎，或牛皰疹病毒2型乳頭炎。
3、牛皰疹病毒2型傳染病流行情況如何？
牛皰疹病毒傳染病分布于世界各地。偽牛皮膚結(jié)節(jié)病首先在南非被報(bào)道，繼之向非洲中部和北部、東歐、西亞、中亞、中國(guó)以及美國(guó)和澳大利亞逐漸擴(kuò)散。牛皰疹病毒2型乳頭炎臨床病例則在英國(guó)、愛爾蘭、保加利亞、意大利、法國(guó)、澳大利亞、美國(guó)、加拿大、盧旺達(dá)、布隆迪、贊比亞、巴西、巴基斯坦和中國(guó)均有零星報(bào)道。同時(shí)，比利時(shí)、荷蘭、新西蘭、南非和納米比亞亦獲得了牛皰疹病毒2型感染的血清學(xué)證據(jù)。新近，在非洲、亞洲和匈牙利亦報(bào)道牛皰疹病毒2型抗體檢測(cè)或幾種無癥狀野生動(dòng)物該病毒DNA檢測(cè)的陽性結(jié)果，表明牛皰疹病毒2型感染遠(yuǎn)較臨床病例更多。德國(guó)2020年5月24日宣布，依據(jù)該國(guó)6801頭奶牛普查結(jié)果，至少目前德國(guó)奶牛群不存在牛皰疹病毒2型感染風(fēng)險(xiǎn)。
4、牛皰疹病毒2型傳染途徑如何？
迄今為止，牛皰疹病毒2型自然傳染模式尚未透徹了解清楚，除直接接觸傳染外，還可經(jīng)擠奶和蚊蠅叮咬傳染，如吸血廄蠅。假如乳頭皮膚完整，則牛皰疹病毒2型不易侵襲致病；因此，乳頭皮膚損傷常為誘發(fā)本病的風(fēng)險(xiǎn)因子之一。牛皰疹病毒2型除經(jīng)感染牛破損皮膚排出外，也能經(jīng)口鼻甚至陰道排出。此外，在健康牛三叉神經(jīng)節(jié)也曾檢出過牛皰疹病毒2型。回歸該奶牛養(yǎng)殖集團(tuán)屬下該奶牛場(chǎng)，我們并未破解該場(chǎng)牛皰疹病毒2型原發(fā)何處。
（曹隨忠 四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 教授；徐雙 某奶牛養(yǎng)殖集團(tuán) 原奶質(zhì)量總監(jiān)；蘆彪 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)反芻動(dòng)物疾病研究中心 碩士研究生；張廷青 博士）
